细胞表面蛋白是免疫治疗靶点发现的关键所在，但传统表面组学技术面临两大瓶颈：灵敏度不足（需大量细胞）和覆盖面有限（单一官能团标记）。2026 年 4 月发表在 Molecular & Cellular Proteomics 上的 SUCAM 技术（Surfaceome Capture by Multiplex biotinylation），通过"多重生物素化"策略突破了这些限制——仅需 120 万个细胞即可高效富集细胞表面蛋白组，在白血病细胞中发现了潜在的免疫治疗新靶点。
一、技术背景：表面组学发现的痛点
细胞表面蛋白（Surfaceome）是药物研发尤其是免疫治疗靶点发现的核心领域。然而现有表面组学技术存在两大瓶颈：
灵敏度不足：现有方法需要相对大量的细胞（通常 >500 万），限制了在稀有样本（如穿刺活检、循环肿瘤细胞）中的应用
覆盖面有限：现有方法基于标记蛋白的单一官能团（如仅标记赖氨酸或仅标记半胱氨酸），无法全面回收表面蛋白的完整图谱
二、SUCAM 核心原理：多重生物素化
SUCAM 的创新在于**"多重化"（Multiplex）**——同时使用多种生物素化试剂，分别针对蛋白表面不同的官能团进行衍生化标记。
技术流程
细胞表面蛋白多重生物素化：使用针对不同官能团的生物素试剂组合，同时对活细胞表面蛋白进行标记
裂解与捕获：细胞裂解后，使用链霉亲和素磁珠捕获所有生物素化蛋白
质谱鉴定：LC-MS/MS 鉴定和表征被拉下的蛋白
关键优势
三、应用成果：白血病细胞表面组图谱
研究团队将 SUCAM 应用于一组白血病细胞系，取得了重要发现：
已知抗原验证：成功识别了白血病经典的细胞表面抗原
新靶点发现：鉴定了此前在该疾病中未被表征角色的表面蛋白，为免疫治疗提供了新的潜在靶点
低输入适用性：在仅 120 万细胞的低输入条件下仍保持稳健的定量精度
这一成果表明，SUCAM 是一种互补的生物素化策略，将促进血液肿瘤和实体瘤的表面组学分析及治疗靶点发现。
四、SUCAM 技术对生物素标记试剂的需求
SUCAM 的成功实施依赖于高质量的多种生物素化试剂组合：
多重生物素化要求各试剂之间不互相干扰，且标记条件兼容活细胞表面环境，这对试剂纯度和反应特异性提出了高要求。
五、对科研工作的启示
1. 低输入样本的表面组学分析
SUCAM 将细胞用量从数百万降至 120 万，使得以下应用成为可能：
穿刺活检样本的表面蛋白分析
循环肿瘤细胞（CTC）表面靶点筛选
稀有细胞亚群的表面组学表征
2. 免疫治疗靶点发现
通过更全面的表面蛋白覆盖，SUCAM 有助于发现传统方法遗漏的潜在靶点，尤其适用于：
血液肿瘤新靶点筛选
实体瘤免疫治疗靶点发现
耐药机制相关的表面蛋白变化
3. 生物素标记质量的重要性
多重生物素化的效果直接取决于试剂质量：
试剂纯度不足会导致非特异性标记
反应效率低会减少可检测的蛋白数量
标记条件不兼容会影响活细胞表面标记效果
六、纳孚生物的生物素标记试剂支持
纳孚生物为表面组学及 Pull-Down 研究提供全系列生物素标记试剂：
NHS-Biotin / Sulfo-NHS-Biotin：高纯度胺反应型试剂，适用于活细胞表面标记
Maleimide-Biotin：高选择性巯基反应型试剂
Hydrazide-Biotin：糖基定向标记试剂
DBCO-Biotin / Azide-Biotin：生物正交标记试剂，适用于多重标记策略
链霉亲和素磁珠：高容量亲和纯化介质，配合生物素化蛋白 Pull-Down
定制标记服务：提供蛋白/抗体/多肽的生物素标记及 DOL 检测
每批次试剂均提供 COA（纯度检测报告），确保多重生物素化实验的可重复性。
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