酪氨酸（Tyr）分子结构中含有羧基（-COOH）、氨基（-NH₂）及酚羟基（-OH）三个活性反应位点。在多肽合成中，为防止非特异性缩合，必须对这些官能团进行正交保护，即根据不同的脱保护条件，选择性地保护特定位点，确保后续合成的精准性。
以下是实验室常用的酪氨酸选择性保护方案及标准操作流程。
一、 核心保护策略
酪氨酸的选择性保护主要针对两个关键位点进行组合，常用组合如下：
- Nα- 保护 + 侧链酚羟基保护
氨基保护：常用Boc（叔丁氧羰基）或FMOC（9 - 芴甲氧基羰基）。Boc 耐酸不耐碱，FMOC 耐碱不耐酸，用于限定 N 端的反应活性。
酚羟基保护：常用Bzl（苄基）或t-Bu（叔丁基）。Bce/t-Bu 对酸稳定，可在多肽合成最后阶段通过强酸脱除。
适用场景：固相多肽合成（SPPS）的标准保护模式。
- 羧基保护 + 氨基保护
用于片段缩合或先制备氨基酸酯中间体，通过甲酯 / 乙酯保护羧基，再选择性脱除氨基保护基。
二、 实验室常规操作流程
以Nα-Boc 保护、侧链 O-Benzyl 保护的酪氨酸合成为例，具体操作路径如下：
三、 关键操作与控点
选择性控制与 pH
氨基保护（Boc 化）需在 ** 弱碱性（pH 8-9）** 下进行，确保氨基以游离态存在；而酚羟基在碱性下易被氧化或烷基化，因此第二步侧链保护必须先活化羧基，再控制温度进行烷基化。
试剂选择
Boc₂O（二碳酸二叔丁酯）是氨基保护的常用试剂，价格低廉且反应温和。
苄基化试剂（如 BnBr）需无水环境，在碳酸钾（K₂CO₃）碱性条件下发生亲核取代，选择性取代酚羟基。
温度控制
侧链保护反应通常在 **60-80℃** 回流下进行，温度过低反应缓慢，过高易导致外消旋化。
四、 应用与注意事项
应用场景：该保护模式是多肽合成的核心基础，广泛应用于胰岛素、生长激素释放抑制因子等复杂多肽药物的制备。
安全提示：Boc₂O 具有刺激性气味，操作需在通风橱内进行；烷基化试剂（BnCl）具毒性，需避免皮肤接触；反应废液需中和处理。
总结
酪氨酸的选择性保护核心在于位点识别与正交条件的匹配。通过 Boc/O-Benzyl 组合，可实现氨基与侧链羟基的同时保护，且不影响羧基活性。严格控制碱度与温度，是高效制备保护酪氨酸的关键。
